来源于嗜热真菌Talaromyces leycettanus JCM12802 的类膨胀素基因鉴定及功能探究

• 作者: 姚斌 寻子琦 涂涛 罗会颖 郑菲 顾源
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 类膨胀素 Talaromyces leycettanus JCM12802 基因克隆 异源表达 CBM融合蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 172-181
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0234

摘要

挖掘新颖的类膨胀素基因,丰富类膨胀素基因资源,探究其功能,加深我们对类膨胀素及其作用机制的认识,促进其工业应用.通过RT-PCR的方法从嗜热真菌Talaromyces leycettanus JCM12802中克隆得到了一个1 196 bp的类膨胀素基因Tlexlx1,并与大多数真菌来源的膨胀素相比,TlEXLX1缺少一个N端的CBM结构域.TlEXLX1与来源于Penicilliopsis zonata的假定蛋白ASPZODRAFT_140583具有最高的序列相似性81%,与Penicillium digitatum Pd1 来源的Expansin-like protein 1相似性为56%.同时构建野生型TlEXLX1和含有 TlSWO1的N端CBM区的突变型CBM-TlEXLX1重组质粒并在毕赤酵母中表达纯化,并对其基本性质进行分析.该基因含有1个内含子(83 bp),编码370个氨基酸和一个终止密码子.TlEXLX1推导氨基酸序列包括一个22个氨基酸的N端信号肽序列,一个类GH45结构域和一个类膨胀素结构域.结果表明,重组蛋白TlEXLX1和融合蛋白CBM-TlEXLX1具有较高的葡聚糖酶活性(地衣多糖:7.2 U/mg和17.2 U/mg ;大麦葡聚糖:4.4 U/mg和9.4 U/mg)和微弱的微晶纤维素水解活性.以地衣多糖为底物时,二者的最适作用温度和pH一致(60℃和6.0).TlEXLX1可以破坏微晶纤维素整齐光滑的表面结构,与商业纤维素酶有一定的协同效果.获得新型的类膨胀素蛋白,有一定的水解活性,在木质纤维素降解等工业中存在潜在的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
3	顾源	中国农业科学院饲料研究所	1	0	0.0	0.0
4	寻子琦	东北农业大学国家教育部大豆生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	郑菲	中国农业科学院饲料研究所	2	1	1.0	1.0
6	涂涛	中国农业科学院饲料研究所	7	7	2.0	2.0