普通肝素对高迁移率族B1介导的内皮细胞紧密连接蛋白Claudin-5下调的保护作用

• 作者: 吴蕾 栾正刚
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 普通肝素 HMGB1 紧密连接 Claudin-5 内皮细胞通透性
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1237-1241
• 页数: 5页
• 字数: 3511字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.11.011

摘要

目的 研究高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)对人脐静脉内皮细胞屏障通透性的影响,以及普通肝素对HMGB1介导的内皮细胞紧密连接蛋白Claudin-5下调的保护作用.方法 将经胰酶消化后的人脐静脉内皮细胞于培养瓶中传代培养,并分成4组:空白对照组(加入等量PBS)、rhHMGB1处理组(100 ng/mL)、普通肝素对照组(UFH 10 U/mL)、rhHMGB1+普通肝素处理组(100 ng/mL rhHMGB1+UFH 10 U/mL).传代培养后的人脐静脉内皮细胞,通过MTT法测定内皮细胞的存活率.Transwell法测定内皮细胞通透性;免疫荧光法对Claudin-5表达及分布进行测定;通过蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Claudin-5蛋白表达.结果 用rhHMGB1(100 ng/mL)处理内皮细胞后,与空白对照组比较细胞活力无明显变化(P>0.05);用rhHMGB1(100 ng/mL)分别处理内皮细胞3 h、6 h后,内皮细胞屏障通透性较空白对照组无明显变化(P>0.05);而经rhHMGB1处理12 h、24 h后,与空白对照组相比,内皮细胞屏障通透性显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).而普通肝素和rhHMGB1共同孵育内皮细胞12 h、24 h后,其内皮细胞屏障通透性均低于rhHMGB1处理组(P<0.05).免疫荧光和Western-blot研究表明,rhHMGB1处理内皮细胞24 h后,细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5分布和表达降低;而经普通肝素和rhHMGB1共同孵育后,细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的表达提高,Claudin-5的荧光强度增强.结论 HMGB1可介导内皮细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的分布异常和表达下降,以及增加内皮细胞屏障的通透性;普通肝素可改善HMGB 1介导的内皮细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的表达和分布及内皮细胞屏障通透性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	栾正刚	中国医科大学附属第一医院重症医学科	30	118	6.0	8.0
2	吴蕾	中国医科大学附属第一医院重症医学科	2	7	1.0	2.0