利用酵母双杂交技术筛选人PROKR2蛋白C端相互作用蛋白

• 作者: 刘化蝶 周文涛 周晓涛 夏开德 彭震 李家大 赵云娟 迪丽娜尔·波拉提
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人前动力蛋白受体2(hPROKR2) SNAPIN 相互作用蛋白 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 38-43
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.01.008

摘要

目的:利用酵母双杂交技术从人cDNA文库中筛选人前动力蛋白受体2(hPROKR2)C端相互作用蛋白.方法:复苏酵母菌Y2HGold-hPROKR2-C,与人cDNA文库杂交,计算杂交效率;筛选相互作用克隆并测序,寻找hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白;通过在DDO/X、QDO/A/X平皿上划线,对筛选到的人cDNA文库质粒的自活性进行验证;采用GST pull down进一步验证两者之间的相互作用.结果:酵母双杂交实验的杂交融合效率为1.375x108;在人cDNA文库中筛选出hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白SNAPIN,GST pull down实验证实两者之间存在相互作用.结论:SNAPIN可与hPROKR2蛋白C端结合.