靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选

• 作者: 付洁 宋海峰 王宇光 王文宇 窦晓倩 翟景勤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1) 适配体 SELEX技术 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 31-37
• 页数: 7页
• 分类号: Q24
• 字数: 5679字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.01.007

摘要

目的:筛选获得特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)的单链DNA适配体.方法:合成全长81 nt,中间含39个随机序列的单链寡核苷酸(ssDNA)文库,运用指数富集配基系统进化(SELEX)技术筛选获得GPC1适配体;酶联免疫吸附分析法(ELISA)实验确定候选适配体与GPC1蛋白的亲和力,流式细胞术确定候选适配体与2种GPC1高表达细胞系(胰腺癌Panc-1细胞和工具细胞Luc-ZR-75-1GPC1)的结合特异性.结果:经过10轮SELEX筛选获得坍适配体,ELISA分析其亲和力为44±0.69 nmol/L,流式细胞术结果表明其与胰腺癌Panc-1细胞和Luc-ZR-75-1GPC1细胞的阳性结合率分别为44.69％和51.44％.结论:筛选获得与GPC1蛋白有较高亲和力、与表达GPC1细胞系特异结合的ssDNA适配体.