绵羊肺炎支原体Hsp70蛋白C末端基因真核表达载体的构建

• 作者: 周碧君 岳筠 张云丹 张双翔 文明 杨源 王军 王慧 程振涛
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 Hsp70蛋白 核酸疫苗 真核表达
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 59-63
• 页数: 5页
• 分类号: S858.26
• 字数: 3551字
• 语种: 中文

摘要

为探讨绵羊肺炎支原体(Mo) Hsp70蛋白作为核酸疫苗的可能性,在对Mo贵州分离株Hsp70蛋白基因进行生物信息学分析的基础上,选择Mo Hsp70蛋白C末端基因,将其与载体pcDNA 3.1(+)进行连接构建重组质粒,通过脂质体转染至CHO细胞,采用RT-PCR和间接免疫荧光方法评价转染效果和真核细胞表达效果.结果显示:Mo贵州分离株Hsp70蛋白的C末端是具有优势抗原表位的区域,通过PCR方法成功扩增出567 bp Hsp70蛋白的C末端基因,并成功构建pcDNA 3.1-Hsp70重组质粒,在转染细胞中PCR扩增出预期大小的目的基因,可以观察到特异性的绿色荧光,提示本研究成功构建的重组质粒能在真核细胞中良好表达,为后续Mo Hsp70蛋白抗原性和免疫佐剂特性的研究奠定基础.