摘要:
目的 用补肾健脾活血方干预沉默Dickkopf(DKK)1、骨硬化蛋白Sclerostin (Sost)转染的成骨细胞,观察其对细胞活性和相关蛋白的影响.方法 将培养好的细胞分为空白对照组(NC组)、沉默DKK1(Ad-shDKK1)组和沉默Sost(Ad-shSost)组,空载腺病毒转染NC组,沉默DKK1和Sost重组腺病毒转染其余两组,再分别给予空白血清和含药血清干预,观察细胞增殖、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性以及骨相关蛋白变化情况.结果 ①三组含药血清干预后的细胞活性强于空白血清干预后的细胞活性.与空白血清干预的三组比较,含药血清干预后的三组细胞活性在24、48、72 h均增加,尤其在72 h时含药血清对Ad-shDKK1组的细胞活性作用更强,与同组空白血清比较,差异有统计学意义(P<0.05);②三组含药血清干预与空白血清干预比较ALP活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).含药血清干预后,与NC组比较,其余两组ALP活性显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),Ad-shDKK1组和Ad-shSost组比较,ALP活性升高不明显;③与空白血清干预比较,含药血清干预后三组的结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)均升高,与NC组比较,Ad-shDKK1组OPG、OPN差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01),Ad-shSost组CTGF、OPG、OPN差异有统计学意义(P<0.05).结论 补肾健脾活血方含药血清可显著促进沉默DKK1、Sost干预后细胞增殖和提高ALP活性,上调沉默DKK1、Sost腺病毒转染细胞CTGF、OPG、OPN的表达.