广藿香原生质体制备、培养与融合技术优化研究

• 作者: 严寒静 何梦玲 张宏意 李磊
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 广藿香 聚乙二醇 原生质体制备 原生质体融合 新品种选育
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 植物生理与分子生物学
• 页码范围: 1310-1318
• 页数: 9页
• 分类号: Q945
• 字数: 6367字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11931/guihaia.gxzw201711027

摘要

为建立高效稳定的广藿香原生质体培养与融合技术体系,该研究以广藿香愈伤组织悬浮细胞为材料,研究了原生质体制备的酶解条件和培养方法、细胞密度、激素种类和浓度等因素对原生质体培养的影响,并通过测定融合产物直径确立融合细胞筛选范围,进一步研究聚乙二醇浓度、细胞密度、融合时间及融合液加入量等因素对原生质体融合的影响.结果表明:制备原生质体的适宜条件为pH5.8,酶解温度25℃;原生质体培养以铵盐减半的MS1培养基进行海藻酸钠包埋、激素选用0.2 mg·L?1 NAA、2.0 mg·L?16?BA,培养密度2.0×105个·mL?1、蔗糖添加量1.0％、酸水解酪蛋白500 mg·L?1的条件下原生质体分裂频率、植板率均较高,且开始分裂时间和细胞团形成时间都较短;双细胞融合产物筛选范围为69.33～87.35μm;以40％PEG 6000化学促融30 min、加入0.5倍体积的融合液、细胞密度2.0×105个·mL?1的条件进行原生质体融合,聚合率可达57.19％;获得的融合产物经海藻酸钠包埋培育2个月后可观察到再生愈伤组织.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宏意	广东药科大学中药学院	10	20	3.0	4.0
3	何梦玲	广东药科大学中药学院	7	5	2.0	2.0
5	严寒静	广东药科大学中药学院	14	18	3.0	4.0
7	李磊	广东药科大学中药学院	4	5	2.0	2.0