细胞色素C氧化酶亚基Cox4的克隆及高效表达

• 作者: 商巾杰 杨艳梅 汪一荣 苏明慧
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 线粒体 粟酒裂殖酵母 细胞色素C氧化酶 Cox4
• 年，卷（期）: 2018,（15）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2018.15.008

摘要

Cox4是电子传递链上复合体Ⅳ的1个关键亚基,实现Cox4的高效表达以及制备其抗体,对于线粒体功能研究至关重要.根据裂殖酵母序列信息数据库(S.pombe_GeneDB)中cox4的基因序列(登录号:SPAC1296.02)设计引物,以粟酒裂殖酵母的cDNA序列为模板,通过PCR扩增技术得到目标蛋白的基因,然后通过克隆构建到含有T7强启动子的表达载体pET-28a(+)上,并将其转入大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)中实现重组工程菌株的构建.结果表明,通过一系列条件优化实现了对重组工程菌株中Cox4的高效表达,并纯化得到大量相应蛋白,最后以纯化的蛋白为抗原成功制备了Cox4抗体.Cox4抗体的成功制备为粟酒裂殖酵母中线粒体功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏明慧	南京师范大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
2	汪一荣	南京师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
3	杨艳梅	南京师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
4	商巾杰	南京师范大学生命科学学院	4	1	1.0	1.0