慢病毒转染敲低HDAC1表达对胃癌干细胞干性增殖、迁移及侵袭的影响及其机制研究

• 作者: 刘复娜 刘小娟 张艳芳 陈策
• 来源期刊: 疑难病杂志
• 关键词: HDAC1 胃癌干细胞 增殖 迁移 侵袭 Nanog BMi1 C-Myc
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著·基础
• 页码范围: 715-718,728
• 页数: 5页
• 字数: 4599字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6450.2018.07.016

摘要

目的 通过慢病毒转染敲低胃癌干细胞观察HDAC1表达对人类胃癌干细胞干性增殖、迁移及侵袭的影响以及对胃癌干细胞干性相关基因表达的影响,进一步探讨HDAC1低表达对人类胃癌干细胞增殖分化的影响及机制.方法 2017年7—10月于华北石油管理局总医院细胞实验室进行.通过慢病毒转染将细胞株分为实验组对照组.以Nanog为胃癌细胞干性标志物,流式细胞术筛选出胃癌干细胞.通过慢病毒转染技术干扰胃癌干细胞中HDAC1表达,实时定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot方法检测干扰效率.采用MTT比色法和划痕试验分别观察2组细胞增殖和迁移能力的差异;通过Transwell实验观察2组细胞侵袭能力的差异;采用qRT-PCR和Western Blot方法检测2组细胞干性相关基因表达.结果 (1)实验组胃癌干细胞的增殖能力在96 h、120 h,均显著低于对照组( t=5. 471、7. 251,P均＜0. 001). (2)通过细胞划痕实验观察到实验组胃癌干细胞的24 h划痕愈合速度较对照组慢, HDAC1的低表达降低胃癌干细胞的迁移能力,2组比较差异具有统计学意义[(20. 23 ± 5. 46)个 vs. (39. 96 ± 3. 48)个,t=6. 813,P=0. 001]. (3)Transwell实验显示,实验组胃癌干细胞的侵袭能力显著低于对照组,HDAC1低表达降低胃癌干细胞的迁移能力,2 组穿膜细胞数差异具有统计学意义[(21. 51 ± 4. 32)个 vs. (62. 63 ± 4. 21)个,t =15. 242,P=0. 000].实验组细胞干性相关基因Nanog、BMil、c-Myc表达均显著低于对照组(0. 23 ± 0. 06 vs. 1. 00 ± 0. 01,t=28. 306,P=0. 000;0. 64 ± 0. 11 vs. 1. 00 ± 0. 01,t=7. 288,0. 001;0. 48 ± 0. 09 vs. 1. 00 ± 0. 01,t=12. 841, 0. 000).结论 HDAC1低表达可降低胃癌干细胞的增殖、迁移及侵袭能力;HDAC1低表达下调BMi1基因表达可能是其降低胃癌干细胞的增殖、迁移及侵袭的机制之一.