TNF-α对肿瘤微环境中BMSCs生物学特性的影响

• 作者: 向中平 崔向荣 朱静 田杰 谭彬
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 肿瘤坏死因子-α 生物学特性
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1002-1008
• 页数: 7页
• 分类号: R730.2
• 字数: 4823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2018.12.02

摘要

目的 探讨C6脑胶质瘤细胞微环境中肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响.方法 将BMSCs与C6脑胶质瘤细胞非接触间接共培养7d,将细胞分为BMSCs组、共培养组、共培养+0.5ng/mlTNF-α组及共培养+5ng/ml TNF-α组(在共培养基础上分别加入0.5ng/ml TNF-α及5ng/ml TNF-α).ELISA分别检测BMSCs、共培养细胞上清中游离TNF-α蛋白的表达情况.采用倒置显微镜观察各组细胞的形态变化;采用CCK8法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测细胞迁移能力;采用Real-time PCR检测细胞中c-Myc、CyclinDl mRNA的表达,Western blotting检测细胞中NF-κB/P65、c-Myc、CyclinDl蛋白的表达.结果 共培养细胞上清中游离TNF-α表达水平[(162.45±31.82)pg/ml]明显低于BMSCs细胞上清[(467.90±150.98)pg/ml](P＜0.05).BMSCs组细胞排列整齐,成纤维状生长,共培养+5ng/ml TNF-α组与BMSCs形态较一致,但凋亡细胞增多,而共培养组及共培养+0.5ng/ml TNF-α组细胞形态显著改变.共培养组细胞增殖能力、G2+S期细胞所占比例以及迁移能力均高于BMSCs组(P＜0.05),且CyclinDl、c-Myc mRNA及蛋白水平表达也高于BMSCs组(P＜0.05),而共培养+5ng/ml TNF-α组细胞增殖能力、G2+S期细胞所占比例以及迁移能力均明显低于共培养组、共培养+0.5ng/ml TNF-α组(P＜0.05),CyclinD1、c-MycmRNA及蛋白水平表达明显低于共培养组、共培养+0.5ng/ml TNF-α组(P＜0.05).结论 C6脑胶质瘤微环境使BMSCs产生肿瘤相关生物学特性的改变,且共培养后TNF-α表达降低可能是引发其生物学特性改变的重要因素,加入高浓度的TNF-α对于维持干细胞本身生物学特性的稳定性有重要意义.