γH2AX和53BP1蛋白在肺正常上皮细胞DNA氧化损伤反应中的表达

• 作者: 刘圆圆 徐克前 杨丽艳 王竹
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 磷酸化组蛋白H2AX P53结合蛋白1 DNA双链断裂 氧化应激 HBE细胞
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 142-147
• 页数: 6页
• 分类号: R34
• 字数: 5317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2018.02.18

摘要

目的 探讨肺正常上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)中磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated H2AX,γH2AX)和p53结合蛋白1(p53-Binding protein 1,53BP1)在DNA氧化损伤反应中的表达.方法 用0、25、50、100、200、400μμmol/L过氧化氢(H2O2)处理HBE细胞1h,对其造成氧化损伤引起DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs);CCK-8比色法检测H2O2对HBE细胞活性的影响,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光显微镜检测HBE细胞核内γH2AX和53BP1蛋白的聚集情况,western blot检测γH2AX、53BP1、BRCA1蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,25 μmol/L H2O2处理组细胞活性(1.07±0.01)升高,50、100、200、400 μmol/L H2O2处理组细胞活性(分别为0.97±0.01,0.96 ±0.01,0.95±0.01和0.94±0.01)降低,差异具有统计学意义(F=50.35,P＜0.01).细胞凋亡检测结果显示,与对照组[(4.65±0.32)％]比较,50、100、200、400μmol/L H2O2处理组细胞凋亡率[分别为(7.54±0.57)％、(7.84±0.68)％、(8.40±0.50)％和(14.03±1.03)％]升高(F=35.879,P＜0.01).与对照组比较,经25、50、100、200、400 μmol/L H2O2处理后γH2AX的平均荧光强度升高(F=223.97,P＜0.01),而经50、100、200、400 μmol/L H2O2处理后53BP1的平均荧光强度降低(F=117.78,P＜0.01);western blot结果显示,随着H2O2浓度升高,γH2AX蛋白表达水平升高,BRCA1和53BP1的表达水平下降,差异均具有统计学意义(F分别为96.20,11.55,21.92,P均＜0.01).结论 在H2O2导致HBE细胞的氧化损伤中,γH2AX可作为DNA氧化损伤标志物,但53BP1的表达下降提示HBE细胞可能通过其他途径进行DNA氧化损伤的修复.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐克前	中南大学湘雅医学院医学检验系	76	363	9.0	15.0
2	刘圆圆	中南大学湘雅医学院医学检验系	7	26	3.0	4.0
3	杨丽艳	中南大学湘雅医学院医学检验系	3	4	1.0	1.0
4	王竹	中南大学湘雅医学院医学检验系	5	10	2.0	2.0