糖谱法结合多元色谱分析比较铁皮石斛功能性多糖结构特征

• 作者: 李绍平 赵静 邓勇 陈乃富 陈凌霄 陈存武 韩邦兴
• 来源期刊: 药物分析杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 铁皮石斛 功能性多糖 单糖组成 糖苷键 含量测定 高效凝胶色谱 多角度激光散射 示差折光法 糖谱法
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 糖类分析专栏
• 页码范围: 41-49
• 页数: 9页
• 分类号: R917
• 语种: 中文
• DOI: 10.16155/j.0254-1793.2018.01.06

摘要

目的:比较不同产地铁皮石斛功能性多糖结构特征,为其质量控制奠定基础.方法:高效凝胶色谱联用多角度激光散射和示差折光仪法(HPSEC-MALLS-RID法)用于测定多糖的重均相对分子质量、回旋半径及含量,色谱柱为TSK-GEL G5000 PWxL串联TSK Gel G3000PWxL,柱温35℃,流动相为9 mg·mL-1氯化钠水溶液,流速0.5 mL·min-1.气相色谱联用质谱法用于分析单糖组成及糖苷键,毛细管色谱柱为Agilent HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm),进样量2μL,用于单糖组成分析的程序升温条件为起始温度165℃,保持7 min,以5℃·min-1升温至185℃,保持5 min,以4℃·min-1升温至200℃,以20℃·min-1升至280℃;用于糖苷键分析的程序升温条件为起始温度120℃,以5℃·min-1升温至200℃,以8℃·min-1升温至250℃,以20℃·min-1升至280℃.基于荧光辅助凝胶电泳、高效薄层色谱-糖谱法分析功能性多糖部分酸水解和酶解产物特征,荧光辅助凝胶电泳采用200 V分离10 min,再调整电压至700 V分离40 min,凝胶在UV 365 nm下成像;TLC展开剂为正丁醇-异丙醇-水-醋酸(7∶5∶2∶1),显色剂为苯胺-二苯胺.结果:不同产地铁皮石斛多糖重均相对分子质量、回旋半径和含量分别为0.533×105～4.575×105、19.8～71.7 nm和6.28％～28.72％;铁皮石斛功能性多糖的单糖组成主要为(乙酰)甘露糖和葡萄糖,摩尔比(3.86～6.99)∶1.00,糖苷键类型主要为1,4-Manp和1,4-Glcp,摩尔比(4.51～7.89)∶1.00;不同铁皮石斛多糖的部分酸水解和酶解产物糖谱特征相似.结论:不同产地铁皮石斛功能性多糖结构具有较高的一致性,功能性多糖是铁皮石斛较好的质量控制指标.