大蒲莲猪不同发育阶段组织RT-qPCR 分析中适宜内参基因筛选

• 作者: 呼红梅 朱荣生 王彦平 王怀中 王诚
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大蒲莲猪 RT-qPCR 内参基因 geNorm NormFind
• 年，卷（期）: 2018,（z1）
• 页码范围: 45-53
• 页数: 9页
• 分类号: Q78|S828
• 字数: 6217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.S1.008

摘要

利用适宜数量且表达稳定的内参基因对目的基因的表达量进行标准化是获得准确、可靠RT-qPCR数据的重要条件.以不同日龄大蒲莲猪8种组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠组织、肌肉、血液)为试验材料,使用geNorm、NormFind软件对8个常用候选内参基因(ACTB、B2M、GAPDH、RPL4、SDHA、TBP、YWHAZ、PPIA)的表达稳定性进行分析,筛选适宜内参基因及其组合.geNorm、NormFind软件联合分析结果表明,不同日龄大蒲莲猪心脏中表达最稳定的内参基因为TBP、PPIA和YWHAZ,肝脏、肾脏、肠组织和肌肉中最稳定的内参基因均为TBP和PPIA,脾脏中表达最稳定内参基因为TBP和RPL4,肺脏中表达最稳定内参基因为TBP、RPL4、PPIA和ACTB,血液中表达最稳定内参基因为ACTB、YWHAZ和GAPDH.由于大蒲莲猪8种体组织中最适宜内参基因组合和数量不同,因此内参基因筛选是进行RT-qPCR数据分析的必要条件.结果可为研究大蒲莲猪目的基因表达时适宜内参基因的选择提供帮助.