中国明对虾Dscam基因的克隆及其在免疫致敏(类免疫)诱导反应中的表达分析

• 作者: 史晓丽 孔杰 孟宪红 曹家旺 栾生 罗坤 董丽君 陈宝龙
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中国明对虾 Dscam基因 免疫致敏 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 633-645
• 页数: 13页
• 分类号: Q785|S945.1
• 字数: 9035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20170510846

摘要

为了研究对虾免疫致敏过程中Dscam基因的表达规律,实验采用同源克隆和RACE技术获得了中国明对虾Dscam基因cDNA全长序列,并对该序列进行生物信息学分析.结果显示,中国明对虾Dscam基因的cDNA全长为6624 bp,其中包括171 bp的5′端非编码区,459 bp的3′端非编码区,开放阅读框的长度为5994 bp,编码1996个氨基酸.推测该基因编码的蛋白含有一个信号肽、10个Ig结构域、6个FNIII功能区、1个胞质尾区和1个跨膜结构域.同源性分析及系统进化分析表明,Dscam基因与节肢动物的Dscam基因首先聚为一类,且与凡纳滨对虾的同源性最高,为92.4%.连续投喂6 d热灭活白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)饵料来诱导免疫致敏反应,在0 、6 和12 d及二次感染后的12、24、48、72和168 h分别取样,用RT-PCR的方法检测中国明对虾Dscam的相对表达量.结果显示,诱导感染组Dscam基因在第12天开始上调,且与阴性对照组和未诱导感染组差异显著;二次感染后24 h,Dscam基因的相对表达量达到最大值,与阴性对照组和未诱导感染组差异显著;48 h后基因表达量开始下降,但表达量仍高于阴性对照组和未诱导感染组.实验表明,中国明对虾存在Dscam基因,并在免疫致敏过程中发挥重要作用.