节瓜CqWRKY1基因的遗传转化

• 作者: 何晓明 姚春鹏 彭庆务 杜翔斐 林毓娥 江彪 王永飞 金庆敏
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 节瓜 Cq WRKY1 农杆菌介导 遗传转化 离体培养
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1060-1069
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2018.06.1060

摘要

为建立和优化节瓜的遗传转化体系,并高效地完成CqWRKY1基因的遗传转化,本研究以节瓜A39为材料,通过RT-PCR技术克隆了节瓜CqWRKY1基因,采用Gateway同源重组法构建了pEarleyGate101-CqWRKY1超表达载体,以节瓜子叶节为外植体,利用农杆菌介导的遗传转化法进行转化.结果表明,子叶节不定芽诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 ABA,诱导率可达76.17％;生根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L-1 IAA;农杆菌侵染的最佳条件为农杆菌浓度OD600为0.3、侵染时间为10 min、共培养时间为3d;最佳的抑菌抗生素为500 mg·L-1的头孢霉素.本研究在181株拟转基因组培苗中共得到76株阳性T0转基因组培苗,其中共有37株移栽成活.PCR结果表明,CqWRKY1已成功整合到37株转化植株的基因组中.本研究结果为进一步研究CqWRKY1基因的功能奠定了一定的理论基础.