转HAL1基因大豆侧翼序列分析及特异性检测方法研究

• 作者: 于志晶 姜志磊 尚丽霞 蔡勤安 马瑞
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 转基因 侧翼序列分析
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 32-38
• 页数: 7页
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2018.01.0032

摘要

为方便HAL1转基因大豆的研究和检测,以转HAL1基因大豆T3代基因组DNA为模板,使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)方法分离其外源基因插入位点的侧翼序列,获得了插入片段DNA序列(T-DNA)的左翼序列和右翼序列.通过比对大豆基因组序列确定其整合位点,确定了HAL1基因的T-DNA在大豆基因组1号染色体非编码区49468395位点以单拷贝插入,转基因事件不影响大豆基因组功能基因的正常表达,而且在200 mmol·L-1NaCl盐胁迫下转基因植株生长力明显强于对照材料.蛋白定量检测结果表明,在叶片中蛋白含量最高可达0.03 mg·g-1,在根茎花中也有表达,但是含量较低.根据整合位点处的左右侧翼序列设计两对特异性PCR检测引物,PCR检测结果显示只有转HAL1基因大豆阳性材料才能扩增出926和816 bp DNA片段.本研究建立的转HAL1基因大豆特异性定性检测方法,对转基因大豆的研究具有重要的意义,也为大豆转基因受体材料的管理与检测提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于志晶	吉林省农业科学院农业生物技术研究所	33	187	7.0	12.0
2	马瑞	吉林省农业科学院农业生物技术研究所	30	179	7.0	12.0
3	姜志磊	吉林省农业科学院农业生物技术研究所	11	42	3.0	6.0
4	蔡勤安	吉林省农业科学院农业生物技术研究所	20	116	6.0	10.0
5	尚丽霞	吉林省农业科学院农业生物技术研究所	12	40	4.0	6.0