利用HPLC分析菠萝愈伤组织DNA甲基化水平

• 作者: 刘胜辉 吴青松 孙伟生 张红娜 李运合 林文秋 肖熙鸥
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 菠萝 愈伤组织 DNA甲基化 HPLC
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 2220-2224
• 页数: 5页
• 分类号: S668.3
• 字数: 3461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.11.016

摘要

建立菠萝DNA甲基化水平的HPLC测定方法,分析菠萝愈伤组织DNA甲基化水平变化,为进一步研究菠萝体细胞无性系变异机理奠定基础.通过对流动相和水解温度等条件的优化,建立菠萝DNA甲基化水平的检测方法.结果表明,分离C和5m-C的最佳流动相为甲醇:磷酸二氢钾:三乙胺为10:90:0.2(V/V),pH 3.0,DNA的最佳水解温度为90℃.利用此体系分析菠萝愈伤组织和胚性愈伤组织的DNA甲基化变化,结果表明,菠萝愈伤组织在分化过程中DNA总甲基化水平呈动态变化,变化范围为5.14％～96.86％.此外,胚性愈伤组织甲基化水平低于非胚性愈伤组织.推测DNA甲基化影响菠萝愈伤组织的分化及胚性愈伤组织的形成.