苦碟子中对香豆酰转移酶基因克隆分析与功能验证

• 作者: 刘涛 周威 张同存 李天真 殷华
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 苦碟子 对香豆酰转移酶 绿原酸 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 120-126
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0340

摘要

苦碟子含有绿原酸等多种酚酸类化合物,该类化合物具有抗氧化和清除自由基等生物活性.对香豆酰转移酶(Hydroxycinnamoyltransferase,HCT)是此类化合物生物合成途径中的关键酶.本研究以苦碟子叶片为实验材料,采用转录组测序、序列分析以及RT-PCR的方法,获得一条对香豆酰转移酶基因,命名为IsHCT(GenBanK:MH151086).序列分析表明该基因长1 320 bp,编码439个氨基酸.通过氨基酸序列比对及生物信息学分析发现,IsHCT氨基酸序列含有两个保守结构域,属于BAHD家族中的HCT酶类.系统发育进化树结果表明,该序列与菊苣的CiHCT的同源性最高,序列相似性高达95％.通过在大肠杆菌中过表达IsHCT和来源于拟南芥的对香豆酰辅酶A连接酶(At4CL),并在发酵培养基中饲喂底物咖啡酸和奎尼酸,在发酵液中检测到绿原酸的合成,表明IsHCT能够催化咖啡酰辅酶A与奎尼酸合成绿原酸,具有对香豆酰转移酶功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘涛	中国科学院天津工业生物技术研究所	145	871	16.0	22.0
2	周威	中国科学院天津工业生物技术研究所	11	230	5.0	11.0
3	张同存		31	69	5.0	6.0
4	殷华	中国科学院天津工业生物技术研究所	7	9	2.0	2.0
5	李天真		1	1	1.0	1.0