脂肪源性间充质干细胞对大鼠皮肤缺损创面巨噬细胞表型的影响

• 作者: 冀玫宏 唐修俊 徐骁然 杨晓双 王达利 魏在荣
• 来源期刊: 中华创伤杂志
• 关键词: 间质干细胞 巨噬细胞 伤口愈合
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 648-654
• 页数: 7页
• 字数: 3980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-8050.2018.07.014

摘要

目的 探讨局部移植同种异体脂肪源性间充质干细胞(ADSCs)对大鼠皮肤创面巨噬细胞表型的影响. 方法 将冻存的原代SD大鼠ADSCs复苏并进行传代培养,取生长良好的第3代细胞进行实验.36只SD大鼠在背部脊柱两侧建立全层皮肤缺损创面.按随机数字表法分为ADSCs组(18只)和对照组(18只).造模后ADSCs组创面皮下环形注射0.2 ml经活细胞染色剂氯甲基-1,1'-双十八烷基-3,3,3',3'-四甲基-吲哚-羰花青-高氯酸盐(CM-Dil)标记的ADSCs悬液(浓度为5×106个/ml);对照组分别予以无血清杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)0.2 ml环形注射于创面周围皮下.伤后3,7,14d,各组每个时相点分别取6只大鼠,测量创面面积并计算愈合率;切取创面组织,HE染色观察组织形态;免疫组化染色观察创面皮肤白细胞介素-10(IL-10)表达情况;伤后14d,倒置荧光显微镜下观察CM-Dil标记的ADSCs在创面组织中的分布情况;免疫荧光染色观察白细胞分化抗原68(CD68)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)双阳性(M1型巨噬细胞)和CD68与精氨酸酶1(Arg-1)双阳性(M2型巨噬细胞)的表达情况.结果 (1)伤后3d,ADSCs组与对照组创面见血痂皮覆盖,周围稍红肿,愈合率相差较大(P＜0.01);伤后7d,ADSCs组与对照组创面均明显减小,ADSCs组创面愈合速度明显快于对照组,ADSCs组创面愈合率明显高于对照组(P＜0.01);伤后14 d,ADSCs组创面基本完全愈合,愈合率接近99％ (P ＜0.01),且ADSCs组的创面愈合皮肤组织质地优于对照组.(2)伤后3d,两组创面均有大量炎性细胞出现,胶原纤维排列均紊乱,无明显差异;伤后7d,ADSCs组创面炎性细胞浸润相对于对照组减少,对照组胶原纤维相对杂乱;伤后14 d,ADSCs组与对照组创面炎性细胞均明显减少,ADSCs组新生血管数量较对照组多,ADSCs组胶原纤维相对于对照组排列更加整齐、规则.ADSCs组创面愈合组织可见CM-Dil标记的ADSCs;对照组未见CM-Dil标记的ADSCs.(3)伤后3d,ADSCs组与对照组创面M1型巨噬细胞分布差异不大,ADSCs组M2型巨噬细胞数量明显比对照组多(P＜0.01),IL-10的表达量不高且两组差异不大;伤后7,14 d,ADSCs组M1型巨噬细胞数明显较对照组少,而M2型巨噬细胞数较对照组明显增多(P＜0.01),ADSCs组IL-10表达量均明显高于对照组(P＜0.01).结论 同种异体ADSCs局部移植可以促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化,促进皮肤缺损创面的再生愈合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏在荣	遵义医学院附属医院整形外科	180	964	14.0	21.0
2	王达利	遵义医学院附属医院整形外科	169	758	14.0	18.0
3	唐修俊	遵义医学院附属医院整形外科	85	399	11.0	14.0
4	冀玫宏	遵义医学院附属医院整形外科	3	6	2.0	2.0
5	徐骁然	遵义医学院附属医院整形外科	2	12	1.0	2.0
6	杨晓双	遵义医学院附属医院整形外科	2	3	1.0	1.0