大鼠骨髓来源树突状细胞的体外分离培养鉴定初步研究

• 作者: 何群君 刘利 刘宇明 李建军 罗志刚 言彩红 黄江波 龙向阳
• 来源期刊: 医学临床研究
• 学科: 医学
• 关键词: 树突细胞 细胞培养技术 细胞分离 分离和提纯
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: R394.26
• 字数: 3496字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7171.2018.01.002

摘要

[目的]探讨建立一种简易、高效的体外分离培养、纯化大鼠骨髓来源树突状细胞(DC)的方法.[方法]采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素-4(IL-4)分离诱导大鼠骨髓来源造血前体细胞7d后得未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC),流式细胞仪检测免疫磁珠纯化前后imDC表面OX62阳性表达率.然后脂多糖(LPS)作用2d刺激imDC成熟得成熟树突状细胞(mature dendritic cell,mDC),流式细胞仪检测imDC及mDC细胞表面CD86、CD80、RT1B阳性表达率,ELISA法检测两组细胞的IL-12分泌水平,体外混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)测定两组细胞促淋巴细胞增殖的能力.[结果]免疫磁珠纯化后imDC表面OX62阳性表达率为91.9％,明显高于纯化前的82.8％(P＜0.05);imDC表面CD86、CD80、RT1B阳性表达率分别是11.48％、6.25％、77.2％,经LPS刺激成熟后的mDC表面CD86、CD80和RT1B阳性表达率分别为91.38％、93.54％、98.6％;imDC细胞的IL-12分泌水平为(36±9)pg/mL,明显低于mDC(228±27)pg/mL(P＜0.01);MLR结果中mDC组刺激T淋巴细胞增殖的能力明显高于imDC组.[结论]本实验通过细胞形态观察、表面分子标志和功能状态三方面相结合对所培养细胞进行鉴定,证实联合应用GM-CSF+ IL-4可体外诱导出高纯度、数量多的DC;通过免疫磁珠纯化可获得相对数量多、纯度高的DC以满足实验需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄江波	南华大学附属第二医院泌尿外科	28	51	4.0	5.0
2	罗志刚	南华大学附属第二医院泌尿外科	135	504	11.0	16.0
3	李建军	南华大学附属第二医院泌尿外科	53	134	6.0	9.0
4	言彩红	南华大学附属第二医院泌尿外科	18	52	5.0	6.0
5	刘宇明		1	0	0.0	0.0
6	刘利	南华大学附属第二医院泌尿外科	4	2	1.0	1.0
7	何群君	南华大学附属第二医院泌尿外科	6	34	2.0	5.0