不同温度胁迫下瓜实蝇RT-qPCR内参基因筛选

• 作者: 姜建军 廖世纯 廖仁昭 杨朗 王凤英 黎柳锋
• 来源期刊: 环境昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: 瓜实蝇 内参基因 温度胁迫 RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1097-1105
• 页数: 9页
• 分类号: Q963|S433
• 字数: 7579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0858.2018.05.17

摘要

特定条件下稳定表达内参基因的筛选是利用实时荧光定量PCR研究基因表达的关键基础.本研究以不同温度胁迫后后的瓜实蝇Bactrocera cucurbitae2龄幼虫、雌虫和雄虫为试验材料,对其9个候选内参基因表达进行了RT-qPCR分析,并利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder4款软件分析各候选内参基因在3种虫态中的表达稳定性.结果表明,18S rRNA基因Ct值(≤5)较小,不适合作为内参基因使用,其它8个内参基因在瓜实蝇2龄幼虫中的稳定性排序为RpL32＞ RPS13＞ TBP＞ β-tubulin＞ TUBE＞ Actin2＞ G6PDH＞ Actin3.雌虫表达稳定性由高到低为:RPS13＞ RpL32＞β-tubulin＞ TBP＞ TUBE＞ Actin2＞ Actin3＞ G6PDH.雄虫表达稳定性为RpL32＞ RPS13 ＞β-tubulin＞ TBP＞ TUBE＞ Actin2＞ G6PDH＞ Actin3.geNorm软件分析各个虫态内参基因最佳组合均为2个.RPS13和RpL32组合可作为瓜实蝇不同虫态下温度胁迫后的内参基因.