番茄斑萎病毒核衣壳蛋白N及膜多糖蛋白Gn的多克隆抗体制备及应用

• 作者: 张德咏 张洁 李俊凯 潘慧 章松柏 赵忠豪 郑立敏
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄斑萎病毒 N蛋白 Gn蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 963-968
• 页数: 6页
• 分类号: S436.412
• 字数: 4668字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2018.09.013

摘要

由番茄斑萎病毒Tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV)侵染引起的番茄斑萎病毒病在我国蔬菜、花卉等作物上造成了严重的经济损失.本研究克隆了TSWV核衣蛋白N基因及膜多糖蛋白Gn基因,利用Gateway系统获得N和Gn基因的原核表达载体.将其转化到大肠杆菌表达菌株Rosetta (DE3)细胞内,IPTG诱导表达N蛋白和Gn蛋白,以此为抗原分别免疫新西兰大白兔,制备N蛋白和Gn蛋白的多克隆抗体.Western blot检测结果表明,N蛋白的多克隆抗体能够与N蛋白发生特异性结合反应,间接酶联免疫吸附(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,in-ELISA)分析检测表明抗体滴度为1∶12 800,而Gn蛋白的多克隆抗体特异性差,效价未检出.本研究制备的N蛋白多克隆抗体可用于田间病株的病害诊断,同时有助于开展病毒在介体昆虫内定位、病毒和介体昆虫互作及功能分析的研究.