结直肠癌干细胞增殖及侵袭中ABCG2基因的效应

• 作者: 孙锋
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: ABCG2基因 结直肠癌 干细胞增殖 基质金属蛋白酶 酶联免疫吸附实验 PCR法 质粒转染 免疫磁珠法
• 年，卷（期）: 2018,（13）
• 所属期刊栏目: 肿瘤干细胞
• 页码范围: 2057-2062
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7414字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.0503

摘要

背景:ABCG2转运蛋白能介导多重耐药,高表达 ABCG2蛋白能提高干细胞对于化疗药物的耐受性,但是ABCG2基因对结直肠癌干细胞增殖、侵袭机制尚未证实.目的:探讨ABCG2基因在结直肠癌干细胞增殖、侵袭中的作用.方法:常规培养结直肠癌细胞系HCT116,将其随机分为4份:其中2份采用免疫磁珠法分离CD133阳性细胞(结直肠癌干细胞),分别用ABCG2-siRNA和ABCG2过表达质粒转染,构建结直肠癌干细胞ABCG2蛋白低表达与过表达模型,设为ABCG2蛋白低表达和过表达组;另2份HCT116细胞分别设为细胞正常组、空质粒转染后对照组.用 MTT、Transwell 法测定不同模型下结直肠癌干细胞的增殖、侵袭变化;利用酶联免疫吸附实验及PCR法测定两种不同细胞模型下基质金属蛋白酶与mRNA表达水平.结果与结论:①流式细胞仪检测显示CD133阳性细胞在结直肠癌细胞系HCT116中占2.4%,经免疫磁珠分选纯化后其比例升至94.51%,证实分离培养的细胞为结直肠癌干细胞;②转染前4组细胞MTT值比较无差异(P > 0.05);ABCG2蛋白低表达细胞模型转染后MTT值低于过表达组(P < 0.05);③Transwell结果表明:ABCG2蛋白低表达组细胞迁移能力受到明显的抑制;而ABCG2过表达组穿过基底膜数目相对较多,细胞的迁移及侵袭能力明显增强(P < 0.05);④酶联免疫吸附实验显示ABCG2蛋白低表达组基质金属蛋白酶水平低于过表达组(P < 0.05);PCR测试mRNA结果与酶联免疫吸附实验相似;⑤提示:下调ABCG2蛋白表达能抑制结直肠癌干细胞增殖、侵袭,ABCG2基因通过调控基质金属蛋白酶水平影响结直肠癌干细胞活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙锋	广州中医药大学第一附属医院肛肠外科	48	226	8.0	14.0