5'端与3'端间同源长度对质粒构建的影响

• 作者: 刘亮伟 梁亚萍 程晋生
• 来源期刊: 河南科学
• 关键词: 同源度 质粒 构建 影响
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 1383-1387
• 页数: 5页
• 分类号: Q566
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3918.2018.09.011

摘要

5'端/3'端间同源长度对分子内同源重组质粒构建的影响还不明确.本研究以与GFO对应的五种反向引物CR1、CR2、CR3、CR4、CR5,分别扩增5'端/3'端间同源长度有10、20、30、40、50 bp的5.9 kb线性质粒pET20b-C2-GH10-C2作为模式DNA,经重组酶Exnase II 37℃体外重组30 min,42℃热激诱导转化BL21(DE3)感受态细胞,比较转化率、质粒位置正确率、接口正确率.结果显示,同源长度30 bp DNA重组后转化子正确质粒最多,正确接口转化率3.4个/ng DNA,其次是同源长度20 bp DNA.电泳检测显示DNA重组后产生nick质粒,是转化子的来源,胞内酶修饰nick可产生基因-载体接口异常.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘亮伟	河南农业大学生命科学学院	36	241	9.0	14.0
3	梁亚萍	河南农业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
4	程晋生	河南农业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0