A型肉毒毒素单克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 刘凌志 吕孙慧 张惟材 李磊 汪建华 游松 熊向华 霍江
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: A型肉毒毒素 单克隆抗体 制备 鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 199-202
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.02.008

摘要

目的:制备并鉴定抗A型肉毒毒素重链C端(BoNT/AHc)鼠源单抗.方法:以BoNT/AHc蛋白为抗原免疫小鼠,利用杂交瘤技术获得鼠源单抗,通过抗体分型、SDS-PAGE、Western印迹及ELISA法分析鉴定.结果:筛选得到3株鼠单抗1B1、1B2、1C6,重链类型均为IgG1,轻链类型均为κ型;3株纯化抗体的纯度达90％以上,均能与抗原BoNT/AHc特异性结合,亲和力常数分别为1.43×1108、2.31×108、1.44×109 L/mol;叠加ELISA结果显示3株抗体与抗原BoNT/AHc结合位点相同或相近.结论:筛选得到3株能与BoNT/AHc特异性结合的鼠源单抗,为A型肉毒毒素中和抗体的研发,以及快速有效的肉毒毒素检测方法的建立奠定了基础.