拟南芥AtTR1相互作用蛋白质筛选和鉴定

• 作者: 刘志斌 姚润东 彭露 朱旭辉 王健美 裴林森 黄奎
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 E3连接酶AtTR1 酵母双杂交 类囊体膜曲率相关蛋白1C 蔗糖转运蛋白5
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 419-424
• 页数: 6页
• 分类号: Q945
• 字数: 4562字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2018.02.036

摘要

本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶A t T R1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取A t T R1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一化通用型cDN A文库进行筛选.结果初步获得了13个与其有潜在互作的候选蛋白.经酵母正向和反向多次验证发现转化了AtTR1与CURT1C和AtTR1与SWEET5的酵母在三缺和四缺培养基中均正常生长,而且在含有X-α-gal的培养基中出现蓝斑.双分子荧光互补技术也证明AtTR1与CURT1C或SWEET5之间也有相互作用.