团头鲂骨组织细胞系的建立及其生物学特性

• 作者: 兰天 关柠楠 刘莉芳 周芬 陈宇龙 高泽霞
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 团头鲂 骨组织细胞 细胞系 基因表达 生物学特性
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 页码范围: 513-521
• 页数: 9页
• 分类号: Q786|S917.4
• 字数: 6500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20170310756

摘要

为研究鱼类骨组织细胞的特征,实验建立了团头鲂骨组织细胞的体外分离培养方法,并对其生物特性进行了鉴定.以3月龄团头鲂尾椎骨及肋骨为实验材料,利用组织块培养法和胰蛋白消化法分别进行骨组织细胞培养,确定最佳培养条件:采用组织块培养法,28 °C培养,M-199培养基中加入体积分数为20%的胎牛血清、25 ng/mL表皮生长因子EGF和25 ng/mL碱性成纤维生长因子bFGF.细胞生物学特性鉴定结果显示:细胞碱性磷酸酶、钙化结节茜素红染色及矿化结节von Kossa氏法染色均呈阳性,表明所培养的细胞具有典型成骨细胞的生物学活性;鱼骨钙素ELISA试剂盒检测培养细胞中骨钙素含量为997.25 ng/L;荧光定量PCR结果显示特异性调节成骨细胞分化的转录因子runx2a、runx2b和osterix基因在团头鲂骨组织细胞系中均有表达,且runx2b和osterix的表达量显著高于团头鲂肌肉细胞系.利用本方法可获得增殖活性良好,生长速率快,且细胞生物学特性稳定的团头鲂骨组织细胞系(MBCs),为日后鱼类骨组织体外实验研究奠定了基础.