嗜热脂肪芽孢杆菌木聚糖酶A的H297F定点突变、表达及酶学性质变化

• 作者: 李婵娟 王婧 王曼玥 石慧
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 木聚糖酶 XynAH297F 定点突变 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 字数: 3674字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015979

摘要

利用重叠延伸PCR技术对嗜热脂肪芽孢杆菌木聚糖酶XynA活性中心附近的H297位点突变为F.将XynA及XynA H297F在大肠杆菌BL21(DE3)中实施了表达、纯化以及酶学性质研究.比较研究野生型木聚糖酶XynA和突变体XynAH297P的酶学性质发现,突变前后木聚糖酶的最适反应pH值均为5.5,在pH 4 ～ 10的缓冲液中处理20 h后残余酶活均在90％以上,均具有较好的pH稳定性.XynA最适反应温度为70℃,80℃处理20min后只有10％的残余酶活;XynA H297最适反应温度为75℃,且相同处理条件下XynAH297仍具有30％左右的残余活性,说明突变体的热稳定性有一定程度提高.与XynA相比,XynAH297F的动力学参数Km、Vmax和Kcat均增大,说明突变后酶对底物的亲和力降低,但催化速率有所提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石慧	武汉设计工程学院食品与生物科技学院	16	30	3.0	5.0
2	李婵娟	武汉设计工程学院食品与生物科技学院	7	21	3.0	4.0
3	王曼玥	武汉设计工程学院食品与生物科技学院	1	1	1.0	1.0
4	王婧	湖北省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所	15	53	5.0	6.0