EDU脉冲追踪小鼠心脏第二心场细胞迁移方法的优化

• 作者: 刘钟颖 袁白银
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 第二心场细胞 EDU 细胞迁移 小鼠
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 84-89
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0518

摘要

流出道(Outflow tract,OFT)发育畸形约占出生时检测到的人类先天性心脏病的 30%,OFT 和右室是由第二心场(Second heart field,SHF)祖细胞发育形成.SHF 祖细胞向心管部署、迁移使心管得以足够的伸展,是心脏形态发生所必需的.然而,迄今 SHF 发育及迁移部署过程仍不清楚.建立标记、追踪小鼠心脏第二心场细胞迁移的方法,对于阐明哺乳动物心脏 SHF 迁移、部署的细胞生物学过程具有重要意义.首先采用文献报道的 EDU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)脉冲追踪方法及剂量(10 mg/kg),发现大部分胚胎并不能被 EDU 标记.接下来,分别对 EDU 标记的剂量以及脉冲标记的时间进行优化,分析 EDU 在 SHF细胞中的标记情况、EDU 标记的 SHF 细胞向 OFT 的迁移情况.发现 EDU 剂量增加到 40 mg/kg 能对胚胎进行有效的标记(由 6 只孕鼠获得的 31 只胚胎均被有效的标记),且不会对孕鼠和胚胎造成毒性;EDU 脉冲标记 2 h 和 4 h,EDU 在 SHF 细胞中的标记效率、EDU 标记 SHF 细胞迁移进入远端 OFT 的距离均没有差异.研究表明使用 40 mg/kg 的 EDU 脉冲剂量和 2 h 的标记时间,可对胚胎的 SHF 细胞进行有效的标记,经过 19 h 的追踪,EDU 标记的细胞能够迁移进入到远端 OFT 中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁白银	武汉科技大学生命科学与健康学院	3	0	0.0	0.0
2	刘钟颖	武汉科技大学生命科学与健康学院	3	0	0.0	0.0