桔青霉产核酸酶P1菌种高效选育方法研究

• 作者: 余华顺 吕育财 姚鹃 王栋 田毅红 郑美娟 郭金玲 雷生姣 龚大春
• 来源期刊: 化学与生物工程
• 学科: 工学
• 关键词: 桔青霉 核酸酶P1 甲苯胺蓝 高效筛选 紫外诱变
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: TQ469|Q936
• 字数: 3790字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5425.2018.02.006

摘要

为了提高产核酸酶P1菌种的筛选效率,研究了甲苯胺蓝-RNA(TB-RNA)平板筛选方法,考察了溶剂体系、甲苯胺蓝浓度、底物RNA浓度等对TB-RNA平板上核酸酶P1酶解圈的影响.结果表明,在甲苯胺蓝浓度为2.0×10-4 mol ·L-1、底物 RNA浓度为0.1%时,于超滤水体系中29 ℃恒温培养,紫外诱变12 h,核酸酶P1的酶活与酶解圈直径呈正相关关系.以酶解圈与菌落直径比1.71为指标,从116株诱变菌株中筛选出10株菌株;经过后期发酵验证,选育出6株优势菌株;通过发酵及遗传稳定性考察,6#菌株的酶活最高,为390 U·mL-1,比原始菌株提高了29%.为工业化生产快速选育菌株提供了高效方法.