荧光定量PCR辐照食品鉴定技术的优化研究

• 作者: 伏毅 刘绵学 李华 潘琳 王艳 郑宇 黄敏
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 辐照鉴定 转座子 马铃薯 DNA损伤
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 77-83
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0481

摘要

为优化荧光定量PCR辐照食品鉴定技术方法,实现对假阳性样本的鉴别能力,降低模板量对鉴定结果的干扰效应.选择马铃薯作为研究材料,分别进行1-12 kGy的 60Co辐照、加热和冻融处理,通过转座子引物筛选、检出限分析、DNA损伤特征比较和剂量曲线回归等方法,探究转座子引物的应用对马铃薯辐照鉴定结果的优化效果.结果显示,转座子引物组合LTR2-5\18S-8与LTR2-2\ACT-5可用于假阳性样本的鉴别,引物组合LTR2-5\18S-5可用于辐照鉴定.优化后方法中"初始循环数差值的指数函数-辐照剂量"标准曲线方程为Y=-0.1581X+ 4.611,线性关系R2为99.24%,优于"初始循环数差值-辐照剂量"的原有模式.通过转座子引物的应用与方法优化,增强了假阳性鉴别能力,消除了模板差异,增强了荧光定量PCR辐照鉴定技术的"剂量-效应关系".