Caco-2细胞体外吸收模型的建立及验证

• 作者: 何开勇 吕晓君 曹易丹
• 来源期刊: 医药导报
• 学科: 医学
• 关键词: Caco-2细胞 吸收,体外 跨膜电阻值 碱性磷酸酶 渗透性
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 药物研究
• 页码范围: 1311-1315
• 页数: 5页
• 分类号: R965
• 字数: 5685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1004-0781.2018.11.004

摘要

目的 建立Caco-2细胞体外吸收模型并对其进行验证,以利于药物吸收转运的研究.方法 Caco-2细胞接种于Transwell 24孔微孔滤膜培养板上,培养3,6,9,12,15,18,21 d,通过观察细胞形态、绘制生长曲线、测定跨膜电阻值(TEER),比较低、中、高细胞浓度(5×104,1×105,2×105·mL-1)对细胞单层完整性的影响,以确定细胞接种密度和培养时间;通过测定荧光黄的跨膜通透性、细胞膜顶侧(AP)、基底侧(BL)及细胞内的碱性磷酸酶活性验证细胞单层通透性和极性分化特征.结果 低、中、高浓度细胞接种后分别在15,12,9 d形成单层膜结构,吸光度达高峰,但生长后期高、中浓度组细胞出现成团、死亡,且TEER值小于低浓度组.低浓度细胞接种15 d TEER值达到300 Ω·cm2,15~21 d基本稳定;选择低浓度(5×104·mL-1)为合适的浓度接种细胞,培养21 d后,荧光黄的表观渗透系数(Papp)为3.57× 10-7cm·s-1,低于通透实验规定的5.0×10-7cm·s-1;细胞内碱性磷酸酶活性增加,膜两侧碱性磷酸酶活性比值( AP/BL)增高5倍多,细胞形成极性分化.结论 所建立的Caco-2细胞模型完整性、通透性与极性分化特征通过验证,可作为模拟小肠药物转运过程的体外模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何开勇		14	13	2.0	3.0
2	吕晓君		12	15	2.0	3.0
3	曹易丹		2	6	2.0	2.0