三疣梭子蟹C型溶菌酶在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性

• 作者: 崔旭 张亚莉 王强厚 陶妍 颜倩倩
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 三疣梭子蟹 C型溶菌酶 毕赤酵母 重组DNA表达 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 135-142
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0241

摘要

C型溶菌酶是存在于各种生物组织中的重要的先天性免疫蛋白,是开发天然抑菌剂的良好候选者.以甲壳类动物三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)C型溶菌酶成熟肽为研究对象,首先通过RT-PCR克隆其编码基因"ptlyC";以pPICZαA为表达载体,构建重组表达载体pPICZαA-ptlyC,电转至毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33后,通过高浓度的博来霉素筛选到高拷贝酵母转化子;在28℃、250 r/min和pH6.0的条件下,经1%的甲醇诱导表达72 h,得到含重组ptlyC的培养液上清;经固化金属离子亲和层析(IMAC)纯化,得到分子量约为25.3 kD的纯化产物.通过菌落计数法证明含重组ptlyC的培养液上清具有抑制革兰氏阳性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的活性;通过琼脂糖凝胶扩散法证明纯化的重组ptlyC具有抑制革兰氏阴性的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和沙门氏菌(Salmonella lignieres)的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶妍	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	34	379	6.0	19.0
2	张亚莉	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	3	5	2.0	2.0
3	王强厚	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	3	9	2.0	3.0
4	崔旭	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	3	9	2.0	3.0
5	颜倩倩	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	2	4	2.0	2.0