去乙酰化酶抑制剂筛选靶向慢性髓系白血病癌基因Bcr-Abl的微小RNA

• 作者: 吴海燕 艾征东 陈立
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 慢性髓系白血病 Bcr-Abl microRNA 细胞增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 字数: 3441字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2018.01.010

摘要

目的 使用去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)筛选靶向作用于慢性髓系白血病癌基因Bcr-Abl的微小RNA(microRNA).方法 通过MTS法检测SAHA对慢性髓系白血病K562细胞增殖活力的影响,确定合适的SAHA作用浓度;Western印迹检测多聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白水平,明确SAHA是否诱导K562细胞发生凋亡;荧光定量PCR检测SAHA对K562细胞Bcr-Abl基因转录水平的影响;通过在线预测软件(Target Scan)和实时荧光定量PCR筛选靶向作用Bcr-Abl的microRNA,并将筛选到的microRNA转染K562细胞,通过MTS法和定量PCR检测转染后K562细胞的细胞活力和Bcr-Abl的mRNA水平.结果 SAHA显著抑制K562细胞增殖并诱导细胞发生凋亡,同时SAHA显著下调Bcr-Abl基因转录水平;SAHA处理K562细胞后,使用Target Scan和定量PCR筛选到可能靶向Bcr-Abl的两个microRNA[microRNA-192(miR-192)和miR-6816],SAHA能诱导它们显著上调,分别上调14.5和5.2倍;向K562细胞转染筛选到的miR-192和miR-6816能够显著抑制K562细胞活力和下调Bcr-Abl基因的mRNA水平.结论 去乙酰化酶抑制剂SAHA促使K562细胞miR-192和miR-6816的上调,miR-192和miR-6816进一步下调Bcr-Abl基因的mRNA水平,进而抑制K562细胞增殖和诱导细胞凋亡.