重组含糖识别结构域的人源半乳糖凝集素-3在糖蛋白/糖肽富集中的应用

• 作者: 孟波 应万涛 张勇 王明超 赵洋 钱小红
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 液相色谱-质谱 半乳糖凝集素-3 糖识别结构域 糖蛋白富集
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1197-1205
• 页数: 9页
• 分类号: O658
• 字数: 5428字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.08017

摘要

植物凝集素是广泛使用的糖蛋白富集和识别材料,动物凝集素则较少被尝试用于糖蛋白富集.基于人源半乳糖凝集素-3的糖识别结构域(CRD),设计了两种重组凝集素:Gal3C(一个CRD)和Tetra-Gal3C(四重串联CRD).通过将两种凝集素固定于链霉亲和素琼脂糖小球上,构造了富集糖蛋白的重组凝集素亲和柱.使用凝胶电泳、免疫印迹以及生物质谱技术对重组凝集素的生物特征及其糖蛋白富集能力进行了表征与评价,发现两种类型的重组凝集素对糖蛋白/糖肽都有良好的富集效果,并具有较高的特异性和灵敏度.相对于Gal3C而言,Tetra-Gal3C由于具有四重串联的CRD结构域,表现出更高的糖蛋白/糖肽富集能力.该凝集素亲和柱成功用于人肝癌细胞系HepG2的糖蛋白富集,表明重组凝集素具有从复杂生物样本中选择性识别和富集糖蛋白/糖肽的能力.