摘要:
目的 探究STAT3与E-cadherin在食管鳞癌中的表达及临床病理相关性,以及在食管鳞癌上皮间质转化中过程中产生的影响.方法 采用RT-qPCR方法检测50例食管鳞癌患者癌组织标本及对应癌旁组织标本中STAT3与E-cadherin的表达;以癌/癌旁正常组织相对表达量表示STAT3与E-cadherin在mRNA水平表达的差异,分析其与患者临床病理特征间的关系;采用简单随机法抽取其中4例食管鳞癌患者组织标本进行Western blotting检测STAT3与E-cadherin的表达情况.采用RT-qPCR及Western blotting方法分别检测3株食管鳞癌细胞株中STAT3与E-cadherin表达,筛选其中高表达的1株进行转染,利用STAT3小干扰RNA作为实验组,以双链无义RNA转染作为对照组,检测STAT3、E-cadherin表达水平变化,并通过细胞划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测实验组细胞迁移与侵袭情况.计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,组间比较应用t检验.结果 50例食管鳞癌组织中STAT3相对表达量为1.87 ±0.71,E-cadherin相对表达量为0.63 ±0.28,癌旁组织STAT3为0.56 ±0.45,E-cadhenn为2.01 ±0.68;临床病理特征分析显示,食管鳞癌中STAT3相对高表达、E-cadherin相对低表达程度均与癌组织浸润深度、淋巴结转移与否相关(P<0.05).其中抽取的4例患者,癌组织中STAT3表达比对应癌旁正常组织高,分别为0.28±0.06、0.05±0.02,P<0.05,而E-cadherin在癌组织中的表达明显低于在对应癌旁正常组织,分别为0.27±0.07、0.59 ±0.09,P<0.05.选取高表达的EC109作为实验用食管鳞癌细胞株,RT-qPCR结果显示,STAT3小干扰RNA转染组较其对照组中STAT3表达明显减少,分别为0.85±0.24、3.01 ±0.20,P<0.05,同时E-cadherin蛋白表达上调,分别为2.69 ±0.29、0.36±0.16,P<0.05;Western blotting检测显示,相对于对照组,转染STAT3小于扰RNA片段成功抑制STAT3蛋白表达后(分别为0.09±0.04、0.32 ±0.18,P<0.05),EC109细胞中E-cadherin表达明显上调(分别为0.75 ±0.11、0.15 ±0.05,P<0.05).下调STAT3表达后,细胞划痕实验及Transwell细胞侵袭实验结果显示,食管鳞癌细胞株EC109中STAT3小干扰RNA转染组迁移率、侵袭细胞数与对照转染双链无义RNA组对比均下降,故下调STAT3表达后迁移、侵袭能力均减弱(P<0.05).结论 在食管鳞癌中,STAT3转录因子可以通过介导E-cadherin表达,影响上皮间质转化表型,从而影响肿瘤迁移与侵袭.