转GsERF71基因苜蓿的培育及耐碱性

• 作者: 于洋 任皓 刘琪 孙晓丽 朱娉慧 朱延明 杜建英 段香波 王子君 陈冉冉 陈超
• 来源期刊: 草业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 肇东苜蓿 GsERF71 遗传转化 PCR RT-PCR southern blot 耐碱性
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 植物生产层
• 页码范围: 2683-2693
• 页数: 11页
• 分类号: S551+.703|Q943.2
• 字数: 8753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11829/j.issn.1001-0629.2018-0019

摘要

基于东北农业大学农业生物功能基因重点实验室前期野生大豆(Glycine soj a)碱胁迫转录组数据,从中获得碱胁迫应答基因GsERF71,选用USER载体构建GsERF71植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化紫花苜蓿(Medicago savita),最终得到69株抗性植株;其中13株通过PCR检测为阳性植株.Southern blot检测获得2株阳性植株,RT-PCR检测发现,这2个株系均为阳性,说明GsERF71已成功整合至苜蓿基因组并能在转录水平上有表达.对非转基因和转基因株系对野生型和转基因株系进行扦插扩繁,分别用0、100、150 mmol·L-1 NaHCO 3的营养液处理转基因植株14 d,进行耐碱性形态指标及生理指标的分析,包括株高、根长和脯氨酸含量、相对质膜透性、丙二醛叶绿素含量、过氧化物酶活性的分析.结果表明,非转基因植株的相对质膜透性和丙二醛含量显著高于转基因苜蓿(P<0.05),而叶绿素含量、株高、根长、脯氨酸含量以及过氧化物酶活性显著低于转基因苜蓿(P<0.05).因此,GsERF71基因的超量表达提高了苜蓿的耐碱能力.