生存素小分子干扰RNA对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生存素基因表达及生物学功能的影响

• 作者: 刘佳 师广勇 涂玲 粱颖红 陈河涛 魏明 龚艳杰
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 肿瘤,鳞状细胞 RNA,小分子干扰 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 细胞运动 生存素 A431细胞
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报道
• 页码范围: 305-309
• 页数: 5页
• 字数: 4580字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.014

摘要

目的 探讨生存素小分子干扰RNA(siRNA)对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生存素基因表达及细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响.方法 培养的A431细胞分为3组:生存素siRNA组、阴性对照组和空白对照组,分别用50.0 nmol/L脂质体包裹的生存素基因序列特异性siRNA、无关序列siRNA阴性脂质体及预制囊泡转染.实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法分别检测A431细胞生存素mRNA及蛋白的表达.采用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪膜联蛋白V/碘化丙锭双染法检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭力,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 转染后48 h,生存素siRNA组、阴性对照组、空白对照组A431细胞中生存素mRNA水平分别为0.56±0.15、0.88±0.37、0.90±0.43,蛋白表达水平分别为0.59±0.04、0.86±0.05、0.91±0.07,差异均有统计学意义(F=276.67、243.61,均P＜ 0.001),且生存素siRNA组生存素mRNA和蛋白表达水平均显著低于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05),而阴性对照组与空白对照组间差异无统计学意义(均P＞ 0.05).重复测量方差分析显示,转染生存素siRNA能抑制A431细胞增殖(F=13.19,P=0.004),且生存素siRNA组A431细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组和空白对照组(均P＜ 0.05),而阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).转染后24 h,3组间A431细胞凋亡率差异有统计学意义(F=83.97,P=0.002),且生存素siRNA组A431细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P＜0.05)和空白对照组(P＜ 0.05),而阴性对照组与空白对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).转染后48 h,生存素siRNA组G2/M期细胞比例显著高于阴性对照组(P＜0.05)和空白对照组(P＜0.05),而生存素siRNA组A431细胞迁移数及侵袭数均显著低于空白对照组(均P＜ 0.05)和阴性对照组(均P＜0.05).结论 生存素序列特异性siRNA能抑制A431细胞生存素基因表达和细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭,提示生存素可成为皮肤鳞状细胞癌基因治疗的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘佳	郑州大学第五附属医院检验科	83	270	8.0	12.0
2	师广勇	郑州大学第五附属医院检验科	23	49	3.0	6.0
3	魏明	郑州大学第五附属医院检验科	74	142	5.0	7.0
4	涂玲	郑州大学第五附属医院检验科	37	93	5.0	7.0
5	龚艳杰	郑州大学第五附属医院检验科	30	83	5.0	7.0
6	陈河涛	郑州大学第五附属医院检验科	5	3	1.0	1.0
7	粱颖红	郑州大学第五附属医院检验科	2	1	1.0	1.0