摘要:
为了探索球形红细菌生物转化2,4-二硝基甲苯(2,4-DNT)的中间产物变化趋势及硝基还原酶性质,研究了不同氮源组合对球形红细菌生物转化2,4-DNT的效率及球形红细菌细胞生长的影响,测定了2,4-DNT及2,4-DNT生物转化产物在不同时间的浓度变化,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)法分析了硝基还原酶的同工酶谱,测得了硝基还原酶的动力学参数.结果表明,球形红细菌转化2,4-DNT的最适组合氮源为(NH4)2SO4/酵母膏;球形红细菌能够高效还原2,4-DNT为4-氨基-2-硝基甲苯(4A2NT)和2-氨基-4-硝基甲苯(2A4NT),但4A2 NT的含量远大于2A4NT的含量,它们没有进一步还原为2,4-二氨基甲苯(2,4-DAT).当2,4-DNT初始浓度为20、40和60 mg·L-1时,对球形红细菌产生硝基还原酶活力有明显的促进作用,当2,4-DNT初始浓度为80 mg·L-1时,对该酶活力有抑制作用;当pH值为7时,球形红细菌产生的硝基还原酶活力最高.球形红细菌中硝基还原酶的动力学参数,最大反应速率vmax和米氏常数Km,分别为0.0507 mmol/(L· min)和0.1 772 mmol·L-1.