甲型副伤寒沙门菌特异性基因筛选及PCR检测体系建立

• 作者: 孟欣 崔葆 张小雨 牛萍 王俊颖 翟立公 赵婉晴
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 甲型副伤寒沙门菌 比较基因组 血清型特异性基因 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 151-157
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.6
• 字数: 6300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201802024

摘要

以甲型副伤寒沙门菌为检测目标,通过比较基因组和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证方法筛选到4个该血清型的特异性基因,其中以gene_310作为该血清型的检测靶点设计引物PA23;并结合沙门菌属特异性引物139-141,建立一种甲型副伤寒沙门菌的PCR检测方法.优化PCR反应体系,并对该检测体系的特异性、灵敏度、抗干扰能力及人工污染样品检出限等方面进行评价.结果表明,当样品中含有甲型副伤寒沙门菌时,该体系能扩增出2条特异性条带,含有其他血清型的沙门菌仅能扩增出284 bp条带,不含沙门菌无扩增条带产生.灵敏度评价表明,基因组DNA和纯菌菌落检出限分别为32.4 pg/μL和4.3×103 CFU/mL;抗干扰能力实验显示,当鸡肉背景菌群和猪肉背景菌群浓度在106 CFU/mL和4.87×107 CFU/mL时,检出限为6.43×104 CFU/mL.当无菌的鸡肉和猪肉样品中添加NCFU/25 g甲型副伤寒沙门菌时,经10h增菌,检测结果为阳性(0＜N＜10).实验建立甲型副伤寒沙门菌PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏度,有很好的应用价值,可在食品安全领域广泛应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟立公	安徽科技学院食品药品学院	30	21	3.0	3.0
2	王俊颖	安徽科技学院食品药品学院	22	21	3.0	3.0
3	张小雨	安徽科技学院食品药品学院	1	3	1.0	1.0
4	孟欣	安徽科技学院食品药品学院	1	3	1.0	1.0
5	崔葆	安徽科技学院食品药品学院	1	3	1.0	1.0
6	赵婉晴	安徽科技学院食品药品学院	1	3	1.0	1.0
7	牛萍	安徽科技学院食品药品学院	1	3	1.0	1.0