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PI3KC3/Beclin1复合物对染矽尘NR8383细胞自噬的调控作用
PI3KC3/Beclin1复合物对染矽尘NR8383细胞自噬的调控作用
作者:
万斌斌
宋瑞瑞
张晓雪
李宁
李小明
李清钊
沈福海
王路遥
蒋守芳
金玉兰
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
自噬
NR8383细胞
Beclin1
Ⅲ型PI3K
p62
摘要:
[目的]探讨PI3KC3/Beclin1复合物在染矽尘大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)自噬中的调控作用.[方法]常规培养NR8383细胞,随机分为4组:对照组,矽尘组,3-MA组和3-MA干预组,分别孵育1、3、6、12、20h后收集样品.采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬底物蛋白p62以及自噬相关蛋白Beclin1、PI3KC3;采用激光扫描共聚焦显微镜观察孵育不同时间的自噬免疫荧光表达情况;采用免疫共沉淀检测Beclin1复合物表达.[结果]免疫荧光结果显示,矽尘组LC3点状聚集绿色荧光亮斑随时间先增强后减弱,在6h时荧光最强,且各时间点较对照组和3-MA干预组荧光亮斑增强;3-MA干预组LC3荧光标记绿色亮斑先增强后减弱,弱于矽尘组,但强于对照组.加入溶酶体抑制剂二磷酸氯喹后,各组LC3绿色荧光信号随时间均呈现增强的趋势.Western blot结果显示,矽尘组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值呈先增加后减少趋势,且在各个时间点均高于对照组(P<0.05);在LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值达最高的6h时间点,矽尘组的值是对照组的248%,是3-MA组的372%.3-MA干预组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值也呈先增加后减少趋势;除1h时间点外,余各时间点均低于矽尘组,但高于对照组(P<0.05);在LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值达最高的6h时间点,3-MA干预组的值是矽尘组的90%,是对照组的223%.Beclin1、PI3KC3蛋白表达趋势与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值一致,p62蛋白表达趋势与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值相反.免疫共沉淀显示,矽尘组Beclin1与PI3K结合增加,3-MA干预后两者结合减少.[结论]矽尘诱导NR8383细胞的自噬活动随时间发生不同程度的改变,3-MA可下调矽尘诱导的NR8383细胞自噬活动,推测PI3KC3/Beclin1信号通路参与矽尘诱导肺泡巨噬细胞的自噬过程.
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文献信息
篇名
PI3KC3/Beclin1复合物对染矽尘NR8383细胞自噬的调控作用
来源期刊
环境与职业医学
学科
医学
关键词
自噬
NR8383细胞
Beclin1
Ⅲ型PI3K
p62
年,卷(期)
2018,(9)
所属期刊栏目
原创精选
研究方向
页码范围
801-808
页数
8页
分类号
R135.2
字数
语种
中文
DOI
10.13213/j.cnki.jeom.2018.18114
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自噬
NR8383细胞
Beclin1
Ⅲ型PI3K
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研究去脉
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期刊影响力
环境与职业医学
主办单位:
上海市疾病预防控制中心
中华预防医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1006-3617
CN:
31-1879/R
开本:
大16开
出版地:
上海市延安西路1326号
邮发代号:
4-568
创刊时间:
1984
语种:
chi
出版文献量(篇)
4682
总下载数(次)
20
总被引数(次)
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