Wnt/β-catenin信号通路与脐带间充质干细胞向肝样细胞的分化

• 作者: 吕莎 尹燕峰 张蕾 彭琴 管峥 苏文君 闪海燕
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带间充质干细胞 细胞分化 肝样细胞 Wnt/β-catenin信号通路 干细胞 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2018,（13）
• 所属期刊栏目: 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 2011-2019
• 页数: 9页
• 分类号: R394.2
• 字数: 9614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.0510

摘要

背景:脐带间充质干细胞可在体内外诱导分化为肝样细胞,然而确切机制目前尚不清楚,研究表明Wnt/β-catenin信号通路与之密切相关.目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路对脐带间充质干细胞肝向分化的影响及其机制.方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞,将培养至第4-6代脐带间充质干细胞分成4组,分别为对照组,常规诱导肝向分化组,激活剂Wnt3a组(在常规诱导肝向分化基础上加入20 μg/L Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a),抑制剂Dkk-1组(在常规诱导肝向分化基础上加入20 μg/L Wnt/β-catenin信号通路抑制剂Dkk-1).分别在诱导第7,14,21,28天收集细胞,采用荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞分化相关基因的mRNA和蛋白表达.运用PAS染色、LDL摄取实验、ICG吸收实验在诱导第28天时进行肝样细胞功能检测.结果与结论:①与对照组相比,常规诱导组、激活剂Wnt3a组、抑制剂Dkk-1组中除了CK-19 mRNA及蛋白表达均下调外(P < 0.01),AFP、ALB、HNF4α mRNA和AFP、HNF4α蛋白表达均显著上调(P < 0.05);②与常规诱导组相比,激活剂Wnt3a组AFP、ALB、HNF4α mRNA及AFP、HNF4α蛋白表达均显著下调(P < 0.05);③与常规诱导组、激活剂Wnt3a组相比,抑制剂Dkk-1组AFP、ALB、HNF4α mRNA及AFP、HNF4α蛋白表达显著增高(P < 0.05);④抑制剂Dkk-1组PAS染色、LDL摄取实验、ICG吸收实验中检测到的阳性细胞最多,常规诱导组其次,阳性细胞最少的是激活剂Wnt3a组;⑤以上结果表明,Wnt/β-catenin信号通路受抑制时可促进脐带间充质干细胞肝向分化,反之,则抑制脐带间充质干细胞肝向分化.