摘要:
目的 观察大蒜素体外干预对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6(HSC-T6细胞),取传3代、对数生长期、生长状态良好的细胞用于后续实验.①将HSC-T6细胞随机分为观察组和对照组,观察组加入含大蒜素100μmol/L的完全培养基,对照组加入等体积含0.1%DMSO的完全培养基,收集观察组培养6、12、24、48 h细胞及对照组培养48 h细胞,倒置相差显微镜下观察细胞密度及细胞形态;另收集两组培养12 h细胞,透射电镜下观察细胞结构、细胞核及染色质分布和凋亡小体形成情况.②将HSC-T6细胞随机分为大蒜素25、50、100、200μmol/L组及空白对照组,各大蒜素组分别给予相应浓度的大蒜素干预,空白对照组不干预,分别于培养6、12、24、48 h采用MTS法检测各组细胞增殖抑制率;培养48 h,采用Western blotting法检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达,并计算Bax/Bcl-2.结果 ①大蒜素对HSC-T6细胞密度、细胞形态及超微结构的影响:观察组随大蒜素作用时间延长,细胞密度降低,多角伪足减少,甚至出现细胞皱缩;培养12 h,观察组胞质浓缩,核染色质凝聚,凋亡小体形成,而对照组无明显变化.②大蒜素对HSC-T6细胞增殖抑制率的影响:随大蒜素浓度升高及作用时间延长,各大蒜素组细胞增殖抑制率逐渐升高,具有浓度和时间依赖性;大蒜素对HSC-T6细胞Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达的影响:随大蒜素浓度升高,各大蒜素组Bcl-2蛋白表达逐渐降低,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达逐渐升高,Bax/Bcl-2逐渐升高.结论 大蒜素体外干预能抑制大鼠肝星状细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与提高Bax/Bcl-2及上调Cleaved Caspase-3蛋白表达有关.