Western blot鉴定背肩胛棕色脂肪黑皮质素4型受体的研究

• 作者: 李强 李海军 杜晨光 杨文雅 潘登 范奎奎
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白印迹 背肩胛骨棕色脂肪组织 转膜液 黑皮质素-4型受体
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 841-846
• 页数: 6页
• 分类号: Q503
• 字数: 3667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.04.023

摘要

旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响.本试验以6～8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白,不同蛋白处理方法及电转膜液的组分、pH为试验对照条件,探究蛋白提取方法、电转液的组分与pH对转膜效率的影响.结果显示,转膜初始电压及功率与转膜液中十二烷基磺酸钠(SDS)含量及pH极显著相关,恒流转膜时,转膜液中SDS含量与转膜电压及功率呈反比,pH为8.0时的转膜电压及功率极显著高于pH 7.6(P＜0.01)和8.6的转膜电压及功率(P＜0.001);MC4R及相关蛋白在醇类物混合裂解液(20％ Methanol-1 ％Triton-1％ SDS-RIPA)的蛋白处理组的表达显著优于单独RIPA的蛋白处理组(P＜0.05),极显著优于Trizol的蛋白处理组(P＜0.01).综上,于MC4R蛋白而言,在裂解液的基础上添加增强剂(Triton和SDS),可促进蛋白提取的效率,提高抗体检测的灵敏性.上述结果有助于相关操作人员对主要细节的认识,提高试验的灵敏及重复性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李强	内蒙古农业大学兽医学院	25	66	4.0	7.0
2	李海军	内蒙古农业大学兽医学院	63	160	6.0	10.0
3	杜晨光	内蒙古农业大学兽医学院	45	106	6.0	8.0
7	范奎奎	内蒙古农业大学兽医学院	15	10	2.0	3.0
8	潘登	内蒙古农业大学兽医学院	13	18	2.0	4.0
9	杨文雅	内蒙古农业大学兽医学院	3	1	1.0	1.0