兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体的制备及初步鉴定

• 作者: 丛日旭 佟巍 刘云波 刘先菊 向志光 张丽芳 滕永康 阮研硕
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 狨猴 抗体制备 酶标抗体
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 101-105
• 页数: 5页
• 分类号: R-33
• 字数: 3289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2018.06.018

摘要

目的 狨猴血清中纯化IgG抗体,制备兔抗狨猴抗血清,并纯化抗血清中IgG,HRP(辣根过氧化物酶)标记兔抗狨猴IgG.方法 HiTrapTMProtein G亲和层析纯化狨猴和兔抗狨猴血清IgG,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行纯度鉴定,免疫琼脂双扩散法(double immunodiffusion assay)测定制备的兔抗狨猴抗血清效价,改良"简易过碘酸钠标记法"制备兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体,酶联免疫吸附测定法( ELISA)及蛋白免疫印迹法(Western blotting)对兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体进行工作浓度测定及特异性鉴定.结果 狨猴和兔抗狨猴血清纯化IgG纯度分别大于95% 、97% ;兔抗狨猴IgG抗血清的效价为1∶64. ELISA和Western blotting鉴定了兔抗狨猴IgG-HRP酶标抗体参考工作浓度为1∶256 000、1∶15 000,特异性明显.结论 制备狨猴IgG-HRP标记抗体并初步鉴定,包括ELISA及Western blotting的特异性及使用浓度,为狨猴病原体免疫学检测体系及分子免疫学检测体系储备了资源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘先菊	中国医学科学院医学实验动物研究所	17	55	5.0	6.0
2	佟巍	中国医学科学院医学实验动物研究所	17	42	3.0	5.0
3	张丽芳	中国医学科学院医学实验动物研究所	23	120	7.0	9.0
4	阮研硕	中国医学科学院医学实验动物研究所	8	22	3.0	4.0
5	向志光	中国医学科学院医学实验动物研究所	25	50	4.0	5.0
6	丛日旭	中国医学科学院医学实验动物研究所	6	4	1.0	1.0
7	滕永康	中国医学科学院医学实验动物研究所	6	5	1.0	1.0