硫酸乙酰肝素对乳鼠颅骨成骨细胞增殖及分化成熟的影响

• 作者: 刘仪 徐朱杰 王瑞 邱立朋 陈敬华
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 硫酸乙酰肝素 成骨细胞 细胞培养 矿化 骨修复
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 421-428
• 页数: 8页
• 分类号: R68
• 字数: 6287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2018.04.001

摘要

目的 探讨硫酸乙酰肝素(heparin sulfate,HS)对乳鼠颅骨成骨细胞增殖及分化成熟的影响.方法 酶消化法分离乳鼠颅骨的成骨细胞,培养并进行鉴定.取生长情况良好的成骨细胞制成浓度为2.0×104个/mL的细胞悬液,依据在成骨细胞培养基中添加不同浓度的HS,将实验分为A组(0 μg/mL)、B组(1 μg/mL)、C组(5 μg/mL)、D组(10 μg/mL)、E组(25 μg/mL)、F组(50 μg/mL)、G组(100 μg/mL).以A为对照组,其余组为实验组.采用噻唑蓝(MTT)法检测48 h及96 h不同HS浓度下细胞的增殖情况,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)检测试剂盒测定细胞24 h和48 h的AKP活性,Western Blot法定量24 h和48 h成骨标志蛋白Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)和Runx－2蛋白的表达,茜素红染色法计数14 d成骨细胞基质矿化结节量.结果 MTT检测示,硫酸乙酰肝素在48 h、96 h均抑制成骨细胞的增殖,相比于对照组差异有统计学意义(P＜0.05).AKP活性检测示,24 h和48 h的E组和F组的AKP活性相比于A组明显增高(P＜0.05),且F组的AKP活性最高.Collagen Ⅰ和Runx-2蛋白表达检测显示,50 μg/mL HS作用24 h和48 h后与对照组相比,Runx－2和Collagen Ⅰ蛋白的表达均升高;100 μg/mL HS作用24 h和48 h后与对照组相比,Runx－2和Collagen Ⅰ蛋白的表达均降低.矿化结节染色示,B、C、D、E、F组均能促进矿化结节的生成,F组对成骨细胞基质矿化作用最强,B、C、D、E和F组相比于A组差异均有统计学意义(P＜0.05).而G组的矿化结节数量低于A组.结论 HS的成骨作用显著,且50 μg/mL HS促进成骨细胞成熟分化的能力显著优于其他浓度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈敬华	江南大学药学院药用生物高分子研究室	80	188	8.0	9.0
2	邱立朋	江南大学药学院药用生物高分子研究室	19	27	3.0	5.0
3	王瑞	南京医科大学附属无锡市人民医院骨科	6	18	3.0	4.0
4	刘仪	江南大学药学院药用生物高分子研究室	10	30	3.0	5.0
8	徐朱杰	南京医科大学附属无锡市人民医院骨科	5	5	1.0	2.0