毕赤酵母Gpn12异戊烯基转移酶NovQ催化合成MK-3

• 作者: 倪文枫 刘会 吴锡华 孙小雯 方雪 李哲敏 杨强 王丽 王鹏 赵根海 郑之明
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: MK-3 毕赤酵母 全细胞催化 优化
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 生物育种与工艺优化
• 页码范围: 140-148
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.170158

摘要

对异戊烯基转移酶NovQ在毕赤酵母Gpn12异源表达过程中诱导剂甲醇添加量进行了探究,并以毕赤酵母Gpn12全细胞为酶源,以甲萘醌、异戊烯醇为前体,催化合成维生素K2 (MK-3).每24 h添加2％甲醇时,NovQ表达量提高约36％.考察摇瓶中初始pH、温度、甲醇添加量、前体(甲萘醌、异戊烯醇)添加量、催化时间、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)添加量等7个因素对Gpn12全细胞催化合成MK-3的影响,发现催化温度、甲萘醌添加量、催化时间影响显著,对3个显著因素进行响应面优化得出催化条件为:催化温度31.56℃,甲萘醌添加量295.54 mg/L,催化时间15.87 h,优化后的摇瓶MK-3产量达到98.47 mg/L,与响应面预测结果一致,较优化前对照组提高了35％.在30 L发酵罐进行生物催化实验,催化时间24 h,细胞催化剂浓度220 g(干重)/L,MK-3产量达到189.67mg/L.该方法为Gpn12规模化生产MK-3奠定了一定的基础.