MehpH的生化与结构特性

• 作者: Ruth Nahurira 乔铖 任磊 樊双虎 王俊欢 王海胜 贾阳 闫艳春
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 邻苯二甲酸单乙基己基酯 食碱戈登氏菌YC-RL2 生化特性 水解酶 结构特性
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 303-313
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20170142

摘要

[目的]本研究旨在系统探究环境因素对邻苯二甲酸单乙基己基酯水解酶(monoethylhexyl phthalate hydrolase,MehpH)活性的影响,模拟该酶的3D结构并分析活性中心氨基酸残基与底物之间的相互作用.[方法]根据标准的酶学实验验证了环境因素对酶活性的影响.该酶的基本结构分析由DNAMAN (2.1)分析所得,同时利用SWISS-MODEL对其3D模型进行预测,并通过PyMOL软件对相关结果作了可视化处理.Autodock工具,Swiss-Pdb以及PyMOL均用以酶与邻苯二甲酸单乙基己基酯(monoethylhexylphthalate,MEHP)的相互作用分析.[结果]该酶的初级结构与已报道Gordonia sp.P8219菌株中的酯类水解酶相似,该酶的最适温度与pH(分别为40℃和8.0)和菌株P8219有所不同;该酶在有机溶剂、洗涤剂和金属离子环境中表现出良好的稳定性;然而,其酶活受2 mol/L的Ni2+、Fe3+、Cu2+和Zn2+离子,1 mol/L苯甲基磺酰氟(PMSF),0.5 mol/L的对氧磷,l mol/L苯基醚(PGO),2 mol/L焦碳酸二乙酯(DEPC)和5 mol/L的毒扁豆碱所抑制.丝氨酸水解酶中高度保守五肽基序GXSXG与催化三联体HSD结构均存在于该酶的编码序列中.根据分子对接结果,Thr152与Ser230在水解酶与其模板之间也显得更为保守,且与MEHP联系较为紧密(分别为5.8 (A)和3.6 (A)),可能起着重要的催化作用.而MEHP与催化氨基酸残基Ser125、His291、Asp259并不十分靠近.[结论]YC-RL2中MehpH在有机溶剂、洗涤剂以及金属离子环境中具有稳定的生物活性,表明其具有良好的应用潜力.酶的结构及活性中心得到了初步的分析,对于催化机理及酶改造研究具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫艳春		42	370	11.0	17.0
2	王海胜		16	119	7.0	10.0
3	贾阳		13	82	5.0	8.0
4	任磊		10	69	5.0	8.0
5	乔铖		4	15	2.0	3.0
6	王俊欢		5	18	3.0	4.0
7	樊双虎		6	18	3.0	4.0
8	Ruth Nahurira		3	32	2.0	3.0