符合大肠癌早期无创分子诊断要求的粪便DNA样本贮存条件考察

• 作者: 刘琳琳 周国华 宋沁馨 沈燚昀 王韵淞 邹秉杰 陈杉
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠癌 无创分子诊断 粪便DNA 保存条件
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 852-857,842
• 页数: 7页
• 分类号: R-33|R735.34
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2018.05.011

摘要

目的:考察在不同温度下储存时间和反复冻融对粪便中人基因组DNA含量的影响.方法:1.将粪便样本在室温、4℃、-40℃和-70℃条件下分别放置不同时间和-40℃条件下保存并反复冻融后,使用QIAamp DNA Stool Mini Kit试剂盒提取得到粪便DNA,通过实时荧光定量PCR体系对人KRAS基因定量确定人基因组DNA含量,评价粪便样本不同冻存条件对其中人基因组DNA含量的影响.2.将粪便DNA样本在4℃和-40℃条件下分别放置不同时间和-40℃条件下保存并反复冻融后,评价粪便DNA样本不同冻存条件下对其中人基因组DNA含量的影响.结果:1).粪便样本常温放置2小时,其中人基因组DNA即发生明显降解(P＜0.01),4℃可保存3天左右,-40℃可保存4周,-70℃可保存3个月以上,粪便反复冻融第3次,其中人基因组DNA降解具有统计学意义(P＜0.05).2).粪便DNA4℃可保存3天,-40℃可保存4周,粪便DNA反复冻融第4次,其中人基因组DNA降解具有统计学意义口(P＜0.05).结论:符合大肠癌早期无创分子诊断要求的粪便DNA贮存条件:粪便样本室温收集后尽快保存;短期可处理的粪便样本存放在4℃条件下(3天内);暂无法处理则存于-40℃(1个月内);粪便样本长期保存在-70℃条件下,可保存3个月.