农杆菌介导抗除草剂基因bar和抗虫基因cry1 ab/ac转化甘蓝型油菜的研究

• 作者: 刘忠松 官春云 官梅 张振乾 熊兴华 肖钢 邬贤梦 陈张彬 陈浩 陈社员
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蓝型油菜 cry1ab/ac基因 bar基因 遗传转化
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 76-81
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|S635.03
• 字数: 4511字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.05.010

摘要

为了获得同时具备抗虫和抗除草剂特性的甘蓝型油菜新种质材料,以湘油15下胚轴为外植体,将人工合成的抗虫融合基因cry1ab/ac与带有草铵膦抗性基因bar的植物表达载体pFGC5941连接,构建了植物表达载体pF-GC-Bt.利用农杆菌介导油菜下胚轴遗传转化体系,将载体pFGC-Bt转入到油菜品种湘油15愈伤组织中.经愈伤组织分化和植株再生,获得了7株T0转基因植株.分株收获这7株转基因油菜的种子,种于花盆中,用除草剂basta喷洒,对存活下来的植株用检测引物进行PCR检测.挑选11株2个基因检测结果都呈现阳性的植株,进行Cry1Ab/Ac蛋白双抗体夹心免疫层析技术检测,在这11株油菜中都检测到了Cry1Ab/Ac蛋白.进行转基因油菜抗菜粉蝶幼虫(菜青虫)的离体鉴定,以非转基因湘油15为对照,结果显示,啃食了转基因油菜叶片的菜青虫停止运动和生长,大概7 d后陆续死亡,而非转基因油菜叶片上的菜青虫表现正常,3 d后叶片基本被其啃食干净.饲喂鉴定结果表明,转抗虫融合基因cry1ab/ac油菜对菜青虫具有明显抗性.得到了同时具有菜青虫和草铵膦双抗性的转基因植株,且抗性显著,为油菜的抗性育种提供了新的材料.